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第358章 將軍與公主(番外)(5/5)

作者:醉臉醺醺字數:14976更新時間:2020-02-07 04:54:55

    

    編碼的VirE2蛋白質是一種單鏈DNA結合蛋白。

    

    功能:VirE2以共價的方式與經過加工的T-DNA分子的5’末端結合,形成T-複合物,以保護其免受核酸酶的降解。

    

    VirF

    

    可能的功能:協助T-DNA轉移到宿主植物細胞中

    

    VirH

    

    功能:可能對植物產生的某些殺菌或者抑菌化合物起解毒作用,從而使農杆菌的生長不受這些物質的抑製

    

    Tzs

    

    編碼與玉米素有關的細胞分裂素異戊(間)二烯基轉移酶,可將玉米素分泌到細胞外(玉米素能促進農杆菌感染部位的植物組織脫分化和細胞分裂)

    

    T-DNA整合到植物核基因組的必要條件。

    

    (1)T-DNA邊界序列

    

    (2)Vir區基因

    

    (3)農杆菌染色體上的基因

    

    12、共整合載體係統的工作原理。

    

    (1)農杆菌和大腸杆菌兩個質粒具有一同源區

    

    (2)兩個質粒接合後經過同源重組形成一個大的共整合質粒

    

    (3)將欲導入植物的外源基因在大腸杆菌中進行克隆和操作,與農杆菌Ti質粒同源重組後,此外源基因就定位於兩個T-DNA邊界序列之間

    

    (4)大腸杆菌質粒不能在農杆菌中進行自主複製,所以不經過重組就無法在農杆菌中穩定存在

    

    13、雙元載體係統的工作原理。

    

    (1)有輔助質粒和穿梭質粒組成

    

    (2)輔助質粒:含有為T-DNA轉移所必須的Vir區段,提供毒性基因功能;含有農杆菌複製起始子;沒有T-DNA邊界序粒

    

    (3)穿梭質粒:具有1-2個T-DNA邊界重複序列;廣譜寄主範圍複製功能和移動功能;細菌選擇標記,如卡那黴素抗性基因;最近構建的穿梭載體攜帶有cosI複製起始子(來自

    

    pBR322),所以可大量製備質粒;編碼植物選擇標記、表達信號,T-DNA邊界序列;有用於外源基因亞克隆的多克隆位點

    

    (4)兩種質粒在單獨存在的情況下都不具備誘發腫瘤的功能

    

    (5)接合後,兩個質粒在選擇壓下可以自主共存於同一農杆菌細胞鄭當農杆菌感染受贍植物時,Ti質粒上的Vir基因與穿梭質粒上的右邊界序列發生反式相互作用,從而將T-DNA轉移進入植物細胞。

    

    14、比較共整合載體係統和雙元載體係統的特點。

    

    共整合載體係統:

    

    雙元載體係統:(1)由兩個彼此相容的質粒組成,兩個質粒可以自主共存在同一農杆菌細胞中(基本特點)

    

    (2)不需體內重組

    

    (3)僅需將一個質粒轉入細菌

    

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